重慶3M測試片
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                  了解細胞培養基的成分后,再也不會犯愁選哪種了!

                  2021-06-09

                     細胞培養市場上有不同品牌,不同種類的基礎培養基,但是其配方都是大同小異,都含有幾種相同的重要組分,那么我們逐一說明。

                    1、葡萄糖

                    葡萄糖濃度代表什么

                    培養基中的葡萄糖濃度范圍從1g/L(5.5mM)到10g/L(55mM)

                    5.5mM的葡萄糖濃度與體內正常血糖的濃度類似

                    高糖培養基可以滿足腫瘤細胞等非生理狀態細胞的體外培養需求

                    選擇高糖還是低糖培養基

                    根據不同細胞類型選擇

                    通常原代細胞、干細胞使用低糖培養基

                    永生細胞系等病理狀態的細胞使用高糖培養基

                    2、丙酮酸鈉

                    作用

                    葡萄糖不足時為細胞提供碳源

                    直接進入三羧酸循環,可以被快速利用

                    什么情況下添加丙酮酸鈉

                    之前培養條件已含有丙酮酸鈉

                    代謝旺盛的細胞

                    丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養基中的終濃度為1mM.

                    3、酚紅

                    pH值指示劑

                    培養基顏色的變化幫助細胞培養者判斷是否需要換液等操作

                    什么情況下建議選擇無酚紅培養基

                    酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素),干預某些細胞在克隆級密度時生長。為避免固醇類反應,在干細胞培養或者進行低密度細胞生長時,應使用無酚紅的培養基。

                  培養基

                    4、HEPES

                    作用

                    穩定pH值

                    本身沒有營養價值,會提高滲透壓,并降低酚紅對pH值的指示作用

                    什么情況下需要加HEPES

                    培養條件pH波動劇烈

                    細胞對pH敏感

                    Hepes的貯存液濃度一般為1M,常溫保存。培養基中的終濃度為25mM

                    5、谷氨酰胺

                    幾乎所有的細胞對谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后,可作為培養細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的谷氨酰胺。

                    谷氨酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷氨酰胺的液體培養基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。

                    試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時,每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培養基中,使其終濃度為2mM培養基。

                    誤區:

                    培養基中的谷氨酰胺容易降解,需要不斷補充

                    正確方案:

                    如果正確使用,一般不需要補加,如:4℃避光保存;分裝,不要反復預熱。

                    6、NaHCO3

                    作用

                    與CO2一起形成緩沖系統,保持培養基PH值穩定。

                    7、GlutaMAXTM

                    GlutaMAXTM 替代L-谷氨酰胺

                    極為穩定,可常溫、2~8℃以及-5~-20℃保存

                    毒性氨積累小化

                    使細胞的性能達到好的

                    提高細胞成活和生長

                    建議不要將其用于昆蟲細胞培養

                    由于釋放谷氨酰胺有一定的延遲,不建議用于剛復蘇的細胞


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